螺旋网 » 生化和分子生物 » 扩增片段测序总是载体片段

森林木 发表于 2010-8-22 14:47

扩增片段测序总是载体片段

最近在做RACE，分别克隆的片段长度大小约700和250bp，但测序结果网上比对都是载体序列。PCR扩增过程中设置对照，可以确定不是单引物扩增，所以请大家帮忙分析一下，谢谢！

qzhaojing 发表于 2010-8-26 21:59

做RACE怎么会有载体..
注意操作时候是否污染

孤风逐日 发表于 2010-9-5 13:41

如果你确定RACE扩增到了你的目的条带，测序出现这种情况就是做克隆时你的连接出了问题，做克隆过程中请用自己的引物做PCR鉴定确定已经导入载体

ejdwwb 发表于 2010-9-8 17:27

学习学习，测序引物用的没错吧？会不会测反了。

zhuzhu 发表于 2010-9-19 21:14

估计连接时没连上

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